乾粉培養基在使用之前必須進行滅菌處理

　　其中│▩☁↟，溼熱滅菌法又包括四種方式✘↟：煮沸法☁☁☁☁╃、流動蒸汽滅菌法☁☁☁☁╃、間歇滅菌法和壓力蒸汽滅菌法◕•。通常來說│▩☁↟，使用比較多的是壓力蒸汽滅菌法◕•。

　　但是對於有些培養基來說│▩☁↟，高壓條件會損壞培養基中的某些成分│▩☁↟，不利於培養基的使用│▩☁↟，所以只能採用煮沸滅菌的處理方法◕•。

　　接下來主要就煮沸滅菌方法進行討論│▩☁↟，話不多說一起看看吧◕•。

　　一☁☁☁☁╃、煮沸滅菌的常見表述

　　有關煮沸滅菌的描述│▩☁↟，通常有如下幾種方式✘↟：

　　a☁☁☁☁╃、稱取本品41.5g│▩☁↟，加熱溶解於1000ml蒸餾水中│▩☁↟，煮沸不要超過2分鐘◕•。無需高壓滅菌◕•。臨用時製備│▩☁↟，不得超過3小時◕•。(參考VRBA培養基✘↟：點選檢視)

　　b☁☁☁☁╃、稱取本品50.3g│▩☁↟，加入1000ml蒸餾水中│▩☁↟，加熱煮沸至完全溶解│▩☁↟，冷至45-50℃│▩☁↟，搖勻│▩☁↟，傾入無菌平皿備用◕•。無需高壓滅菌◕•。(參考BS培養基✘↟：點選檢視)

　　c☁☁☁☁╃、稱取本品89g│▩☁↟，煮沸溶解於1000ml蒸餾水中│▩☁↟，冷至45-50℃時│▩☁↟，傾入無菌平皿│▩☁↟，備用◕•。注✘↟：無需高壓滅菌◕•。(參考TCBS培養基✘↟：點選檢視)

　　d☁☁☁☁╃、稱取本品57g│▩☁↟，加熱攪拌溶解於1000ml蒸餾水中│▩☁↟，不要過分加熱│▩☁↟，冷至50-55℃時│▩☁↟，傾入無菌平皿,部分開蓋乾燥2h│▩☁↟，然後蓋上│▩☁↟，備用◕•。無需高壓滅菌◕•。在 24小時內使用◕•。(參考XLD培養基✘↟：點選檢視)

　　這些方法描述中│▩☁↟，都特別強調“無需高壓滅菌”☁☁☁☁╃、“不要過分加熱”☁☁☁☁╃、“煮沸充分溶解”│▩☁↟，那麼究竟該怎樣操作│▩☁↟，才能達到既滅菌完全又儘量降低對培養基的破壞呢?

　　二☁☁☁☁╃、煮沸滅菌的實際操作

　　1☁☁☁☁╃、關於煮沸方式│▩☁↟，有人提出可以隔水煮沸│▩☁↟，但經過反覆試驗│▩☁↟，發現這種煮沸方式存在兩大弊端✘↟：①溫度不夠│▩☁↟，達不到滅菌效果;②經隔水煮沸的含瓊脂培養基│▩☁↟，在水浴的過程中易出現分層現象◕•。

　　2☁☁☁☁╃、為了對培養基進行有效煮沸滅菌│▩☁↟，根據我們實踐摸索│▩☁↟，建議如下操作✘↟：

　　①準備好電磁爐和搪瓷缸(不要用鐵質容器);

　　②將培養基按比例加水│▩☁↟，稱量至搪瓷缸中│▩☁↟，用玻璃棒不斷攪拌│▩☁↟，直至完全溶解☁☁☁☁╃、無明顯團狀物或顆粒;

　　③將搪瓷缸置於電磁爐上│▩☁↟，大火燒開│▩☁↟，期間持續攪拌│▩☁↟，避免糊底;當液麵完全沸騰後│▩☁↟，立即將搪瓷缸從電磁爐上拿開│▩☁↟，算是一次煮沸操作;液麵回落後│▩☁↟，立即放回電磁爐│▩☁↟，重複上面的步驟;總共煮沸3次即可◕•。

　　④將煮好的培養基冷卻至需要的溫度│▩☁↟，進行傾注平皿等操作◕•。