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乾粉培養基在使用之前必須進行滅菌處理

點選次數✘↟:216 釋出時間✘↟:2022-03-15
   乾粉培養基在使用之前必須進行滅菌處理│▩☁↟,將其所含活菌全部殺死或全部除去◕•。常用的滅菌方法有過濾除菌☁☁☁☁╃、乾熱滅菌☁☁☁☁╃、溼熱滅菌及輻照滅菌等◕•。

  其中│▩☁↟,溼熱滅菌法又包括四種方式✘↟:煮沸法☁☁☁☁╃、流動蒸汽滅菌法☁☁☁☁╃、間歇滅菌法和壓力蒸汽滅菌法◕•。通常來說│▩☁↟,使用比較多的是壓力蒸汽滅菌法◕•。

  但是對於有些培養基來說│▩☁↟,高壓條件會損壞培養基中的某些成分│▩☁↟,不利於培養基的使用│▩☁↟,所以只能採用煮沸滅菌的處理方法◕•。

  接下來主要就煮沸滅菌方法進行討論│▩☁↟,話不多說一起看看吧◕•。

  一☁☁☁☁╃、煮沸滅菌的常見表述

  有關煮沸滅菌的描述│▩☁↟,通常有如下幾種方式✘↟:

  a☁☁☁☁╃、稱取本品41.5g│▩☁↟,加熱溶解於1000ml蒸餾水中│▩☁↟,煮沸不要超過2分鐘◕•。無需高壓滅菌◕•。臨用時製備│▩☁↟,不得超過3小時◕•。(參考VRBA培養基✘↟:點選檢視)

  b☁☁☁☁╃、稱取本品50.3g│▩☁↟,加入1000ml蒸餾水中│▩☁↟,加熱煮沸至完全溶解│▩☁↟,冷至45-50℃│▩☁↟,搖勻│▩☁↟,傾入無菌平皿備用◕•。無需高壓滅菌◕•。(參考BS培養基✘↟:點選檢視)

  c☁☁☁☁╃、稱取本品89g│▩☁↟,煮沸溶解於1000ml蒸餾水中│▩☁↟,冷至45-50℃時│▩☁↟,傾入無菌平皿│▩☁↟,備用◕•。注✘↟:無需高壓滅菌◕•。(參考TCBS培養基✘↟:點選檢視)

  d☁☁☁☁╃、稱取本品57g│▩☁↟,加熱攪拌溶解於1000ml蒸餾水中│▩☁↟,不要過分加熱│▩☁↟,冷至50-55℃時│▩☁↟,傾入無菌平皿,部分開蓋乾燥2h│▩☁↟,然後蓋上│▩☁↟,備用◕•。無需高壓滅菌◕•。在 24小時內使用◕•。(參考XLD培養基✘↟:點選檢視)

  這些方法描述中│▩☁↟,都特別強調“無需高壓滅菌”☁☁☁☁╃、“不要過分加熱”☁☁☁☁╃、“煮沸充分溶解”│▩☁↟,那麼究竟該怎樣操作│▩☁↟,才能達到既滅菌完全又儘量降低對培養基的破壞呢?

  二☁☁☁☁╃、煮沸滅菌的實際操作

  1☁☁☁☁╃、關於煮沸方式│▩☁↟,有人提出可以隔水煮沸│▩☁↟,但經過反覆試驗│▩☁↟,發現這種煮沸方式存在兩大弊端✘↟:①溫度不夠│▩☁↟,達不到滅菌效果;②經隔水煮沸的含瓊脂培養基│▩☁↟,在水浴的過程中易出現分層現象◕•。

  2☁☁☁☁╃、為了對培養基進行有效煮沸滅菌│▩☁↟,根據我們實踐摸索│▩☁↟,建議如下操作✘↟:

  ①準備好電磁爐和搪瓷缸(不要用鐵質容器);

  ②將培養基按比例加水│▩☁↟,稱量至搪瓷缸中│▩☁↟,用玻璃棒不斷攪拌│▩☁↟,直至完全溶解☁☁☁☁╃、無明顯團狀物或顆粒;

  ③將搪瓷缸置於電磁爐上│▩☁↟,大火燒開│▩☁↟,期間持續攪拌│▩☁↟,避免糊底;當液麵完全沸騰後│▩☁↟,立即將搪瓷缸從電磁爐上拿開│▩☁↟,算是一次煮沸操作;液麵回落後│▩☁↟,立即放回電磁爐│▩☁↟,重複上面的步驟;總共煮沸3次即可◕•。

  ④將煮好的培養基冷卻至需要的溫度│▩☁↟,進行傾注平皿等操作◕•。

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